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對黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測卡檢測原理及試驗(yàn)方法進(jìn)行說明

更新時(shí)間:2018-12-22點(diǎn)擊次數(shù):2469
  黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測卡主要的結(jié)構(gòu)為二呋喃環(huán)及香豆素。目前已發(fā)現(xiàn)的20多種黃曲霉毒結(jié)構(gòu)之中,常見的有 AFB1、AFB2、AFG1、AFG2,其中黃曲霉毒素 B1(AFB1) 毒性zui強(qiáng),被癌癥研究機(jī)構(gòu)IARC劃定為 IA類致癌物。由于黃曲霉和寄生曲霉在自然界的分布很廣,而且很多食品基質(zhì)本身的濕度為菌落的繁殖和毒素的產(chǎn)生提供了有利條件,農(nóng)作物在田間受到黃曲霉的污染,收割后貯藏過程中如溫度和濕度適宜,黃曲霉孢子會(huì)大量繁殖產(chǎn)生更多的毒素,在糧食和飼料的貯藏過程中不可避免產(chǎn)生毒素。
 
  黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測卡檢測原理:
 
  黃曲霉毒素M1(AFM1) 時(shí)間分辨熒光免疫層析定量檢測卡應(yīng)用競爭抑制免疫層析的原理,樣本中若含有AFM1,則在側(cè)向移動(dòng)的過程中會(huì)與熒光微球標(biāo)記的特異性單克隆抗體反應(yīng),抑制抗體和NC 膜檢測線上AFM1 - MSA 偶聯(lián)物的結(jié)合。隨著樣本中AFM1 含量的升高,結(jié)合于檢測線上的抗體量減少,相應(yīng)的檢測線熒光強(qiáng)度也隨之變?nèi)酢J褂脮r(shí)間分辨熒光免疫層析檢測儀讀數(shù),可定量的測出樣本中AFM1 的含量。
 
  黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測卡試驗(yàn)方法:
 
  1、樣品的前處理:
 
  取具有代表性的待測樣品500g,用小型粉碎機(jī)粉碎1min后過20目篩,收集過篩的細(xì)小樣品。稱取1.0±0.02g過篩的樣品于10mL離心管中,加入5mL提取液,用漩渦混勻儀震蕩5min(或者搖床振蕩10min)后,4000RPM離心1min,取上清。
 
  2、檢測過程:
 
  取50μL離心上清液加入500μL樣品稀釋液中,用漩渦混勻器混勻3-5s,然后取100μL加入到黃曲霉毒素B1熒光定量快速檢測卡的加樣孔中,置于37℃恒溫孵育器中溫育10min后,將試紙條插入熒光免疫定量分析儀中讀數(shù),即為樣品的實(shí)際檢測濃度。當(dāng)檢測值大于5000μg/kg時(shí),可用提取液將離心上清液稀釋5倍后再進(jìn)行檢測,所得讀數(shù)值乘以對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為終的檢驗(yàn)結(jié)果。
 
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